模板基因翻译 选修3-1基因工程-简指南

题目乘法、口算、100题、七年级、有理数混合运算、100题、计算机一级题库、二元线性方程、应用题、真与假、刺激题、基因工程教学大纲要求1、基因工程的诞生Ⅰ 2、基因工程原理与技术Ⅱ 3、 基因工程的应用Ⅱ 4、 蛋白质工程Ⅰ 基因结构、非编码区、非编码区、编码区、编码区上游、编码区下游、RNA聚合酶结合位点启动子终止子RNA聚合酶可以识别调控序列中的结合位点并与之结合。转录开始后，RNA聚合酶沿着DNA分子移动，并以DNA分子的一条链为模板合成RNA。转录完成后，RNA链被释放，然后RNA聚合酶也从DNA模板链上脱落。1、 原核细胞①的基因结构不能转录成信使RNA，不能编码蛋白质。: 可以转录相应的信使RNA，可以在蛋白质编码区的非编码区编码原核细胞的基因结构②有调控遗传信息表入党维权调查表编号和毫米对照表教师职称级别列出员工考核评分表普通年金现值系数表示的核苷酸序列，其中*重要的序列是位于编码区上游的RNA聚合酶结合位点。启动子1、原核细胞的基因结构2、真核细胞的基因结构编码区和RNA聚合酶结合位点内含子外显子外显子：可以编码蛋白质的编码区序列内含子：不能编码蛋白质的序列编码区。启动子终止符。编码区上游和编码区下游的基因结构。编码区中的外显子。非编码区。外显子：可以编码蛋白质的序列。序列：调节性核苷酸序列，包括位于编码区上游的 RNA 聚合酶结合位点。真核细胞的基因结构编码区和RNA聚合酶结合位点内含子外显子：可编码蛋白质的编码区序列内含子：编码区不能编码蛋白质的序列。启动子终止符。编码区上游和编码区下游的基因结构。编码区中的外显子。非编码区。外显子：可以编码蛋白质的序列。序列：调节性核苷酸序列，包括位于编码区上游的 RNA 聚合酶结合位点。真核细胞的基因结构编码区和RNA聚合酶结合位点内含子外显子：可以编码蛋白质的编码区序列内含子：编码区不能编码蛋白质的序列。启动子终止符。编码区上游和编码区下游的基因结构。编码区中的外显子。非编码区。外显子：可以编码蛋白质的序列。序列：调节性核苷酸序列，包括位于编码区上游的 RNA 聚合酶结合位点。编码区上游和编码区下游的基因结构。编码区中的外显子。非编码区。外显子：可以编码蛋白质的序列。序列：调节性核苷酸序列，包括位于编码区上游的 RNA 聚合酶结合位点。编码区上游和编码区下游的基因结构。编码区中的外显子。非编码区。外显子：可以编码蛋白质的序列。序列：调节性核苷酸序列，包括位于编码区上游的 RNA 聚合酶结合位点。

非编码序列：包括非编码区和内含子2、真核细胞基因结构原核细胞基因结构真核细胞基因结构原核细胞和真核细胞基因结构对比编码原核细胞和真核细胞。编码区是________。编码区是间隔的。_____的相同点是可以编码蛋白质的______和具有调节作用的______区分：启动子和起始密码子启动子起始密码子位于DNA上基因的非编码区，是位于编码区上游段（左侧）mRNA的起始处，即单链信使RNA（转录产物）功能性转录时，与RNA聚合酶结合，在 mRNA 的转录中起调节作用。它是翻译的开始，也是肽链延伸中第一个氨基酸的位置。区分：终止子和终止密码子11 终止密码子位于DNA上基因的非编码区，编码区的下游片段（右侧）位于mRNA上。例如，UAUAUAGUGA 功能阻碍了 RNA 聚合酶的运动并从 DNA 模板上脱落。. 代表肽链翻译的基因工程概念的定义：又称重组DNA技术，是指按照人们的意愿进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物体新的遗传特征, 从而创造出更符合人们需求的新型生物品种和生物制品。目的：生产满足人类需求或创造新的生物性状的产品，并能稳定遗传。基因工程概念基因剪接技术或DNA重组技术生物体外基因DNA分子水平人体所需基因产物剪切→剪接→导入→必需基因重组检测基因工程别名操作环境操作对象操作级基本过程结果限制核酸切丁机DNA连接酶载体2.基因表达载体构建4.靶基因检测与鉴定3.靶基因导入受体细胞1.靶基因获取1.@k12@ >

工具基因的大小是以纳米计算的，它的运行需要非常精细的工具。基因操作至少需要以下三个工具：分子剪刀-限制性内切酶分子针线-DNA连接酶分子转运载体-载体1、限制性内切酶（限制性内切酶）（1）部分作用：磷酸二酯键（2） 特点：特异性，即识别特定的核苷酸序列，切割特定的位点。（3） 例：一种大肠杆菌限制性内切酶，可以识别GAATTC序列，在G和A.（4）来源：主要从原核生物中分离出原因：限制酶是生物体（主要是微生物）中的酶。它可以切割外源DNA，对自身DNA无害，并保护细胞的原始遗传信息。因为这种切割作用是在 DNA 分子内部进行的，所以称为限制性内切酶。（真核生物一般都有其他保护措施。） 注：限制酶是指一类酶，而不是酶。（5） 作用：形成DNA片段的末端 ①空白端：平切（同一部分） ②粘端：错位切割（不同部分） ）DNA被限制性内切酶切割后，有两个反向互补的“粘结束”。由相同限制酶切割的多个 DNA 具有相同的粘性末端，可以通过互补配对。121212 什么是粘性末端？被限制性内切酶切割的两条单链DNA有几个延伸的核苷酸，它们是完全互补的配对。这种切口称为粘性末端。讨论 1. 以获得某个特定性状的基因必须用限制性内切酶切割多少个？可以产生多少粘性末端？需要两次切割才能产生四个粘性末端。

讨论 2. 如果用相同的限制酶切割来自不同来源的两条 DNA 会发生什么？会产生同样的粘性末端，然后让两个粘性末端粘在一起模板基因翻译模板基因翻译，就可以合成重组DNA分子了。２、基因的针线──DNA连接酶（2）连接部分：DNA双链片段之间的磷酸二酯键（注意：不是氢键）。（1）连接酶功能：连接两个双链-链DNA片段，使其成为完整的DNA分子。（3）常见物种：①E.coli DNA连接酶来源：大肠杆菌 功能：连接粘性末端 ②T4DNA连接酶来源：T4噬菌体功能：连接粘性末端，平末端(4） 与DNA聚合酶比较）蛋白质蛋白质磷酸二酯键（单脱氧核苷酸+片段）磷酸二酯键（DNA双链片段+DNA双链链片段）需要（DNA链）不需要DNA聚合酶DNA连接酶作用的化学性质网站模板 动植物病毒。（1） 作用：将外源基因送入受体细胞。（2） 条件：①可在宿主细胞内复制并稳定储存。②用一种或多种限制酶指向其中插入外源基因。③有一定的标记筛选基因，如抗生素抗性基因、显色反应产物基因等 ④安全，对受体细胞无害，不影响其正常活动。应根据接收小区的类型选择合适的载波。*常用的载体——质粒1.2基因工程的基本操作流程一、获得目的基因1、目的基因主要是指___________________

_____________________，___________，_______，___________。②原理：__________④方法：通过_____进行扩增，即____（n为扩增循环数）⑤结果：可选1聚合酶链反应体外特异性DNA片段。DNA复制。已知基因的核苷酸序列。四个脱氧核苷酸。一对引物。DNA聚合酶指数2n使目的基因片段在短时间内大量扩增（2)利用PCR技术扩增目的基因12 6 过程：a. DNA变性（90°C-95 °C)：目的基因DNA受热变性，_____断裂形成__________ b，复性（55°C-60°C）：系统温度降低，引物与DNA模板结合形成局部________。__________④方法：用_____进行扩增，即____（n为扩增循环数） ⑤结果：可选1聚合酶链反应体外特异性DNA片段。DNA复制。已知基因的核苷酸序列。四个脱氧核苷酸。一对引物。DNA聚合酶指数2n可以使目的基因片段在短时间内大量扩增（2)利用PCR技术扩增目的基因12 6 过程：a. DNA变性（90°C-95 °C)：目的基因DNA受热变性，_____断裂形成__________ b，复性（55°C-60°C）：系统温度降低，引物与DNA模板结合形成局部________。__________④方法：用_____进行扩增，即____（n为扩增循环数） ⑤结果：可选1聚合酶链反应体外特异性DNA片段。DNA复制。已知基因的核苷酸序列。四个脱氧核苷酸。一对引物。DNA聚合酶指数2n使目的基因片段在短时间内大量扩增（2)利用PCR技术扩增目的基因12 6 过程：a. DNA变性（90°C-95 °C)：目的基因DNA受热变性，_____断裂形成__________ b，复性（55°C-60°C）：系统温度降低，引物与DNA模板结合形成局部________。可选 1 聚合酶链反应体外特异性 DNA 片段。DNA复制。已知基因的核苷酸序列。四个脱氧核苷酸。一对引物。DNA聚合酶指数2n可以使目的基因片段在短时间内大量扩增（2)利用PCR技术扩增目的基因12 6 过程：a. DNA变性（90°C-95 °C)：目的基因DNA受热变性，_____断裂形成__________ b，复性（55°C-60°C）：系统温度降低，引物与DNA模板结合形成局部________。可选 1 聚合酶链反应体外特异性 DNA 片段。DNA复制。已知基因的核苷酸序列。四个脱氧核苷酸。一对引物。DNA聚合酶指数2n可以使目的基因片段在短时间内大量扩增（2)利用PCR技术扩增目的基因12 6 过程：a. DNA变性（90°C-95 °C)：目的基因DNA受热变性，_____断裂形成__________ b，复性(55°C-60°C)：系统温度降低，引物与DNA模板结合形成局部________。@2) 利用PCR技术扩增目的基因 12 6 过程： a．DNA变性（90°C-95°C）：目的基因DNA受热变性，_____断裂形成_________ b，复性（55°C-60°C）：系统温度降低，引物与DNA结合模板以形成本地________。@2) 利用PCR技术扩增目的基因 12 6 过程： a．DNA变性（90°C-95°C）：目的基因DNA受热变性，_____断裂形成_________ b，复性（55°C-60°C）：系统温度降低，引物与DNA结合模板以形成本地________。

C。延伸（70℃-75℃）：在Taq酶的作用下，从引物的5'端→3'端延伸，合成与模板互补的________。以上步骤循环进行氢键单链DNA双链DNA链1. 用一定的_________切割质粒做一个切割，露出____________。2.使用_____________切断目标基因产生_________________。二、基因表达载体构建3. 将切好的目的基因片段插入到质粒的______中，然后加入适量的__________，形成重组DNA分子（重组质粒）限制酶粘端切割DNA连接酶末端相同的限制性内切酶是同核质粒DNA分子限制性内切酶处理一次切割，两个粘性末端，两次切割获得目的基因DNA连接酶重组DNA分子（重组质粒）-核心相同二、基因表达载体构建4.流程：5.基因表达载体组成：复制起点+靶基因+启动子+终止子+标记基因它们是做什么的？——构建核心二、基因表达载体复制起点：DNA复制有特定的起始位点。启动子：位于基因首端的一段特殊 DNA。它是 RNA 聚合酶识别并结合以启动转录的位点。终止子：基因末端的一段特殊 DNA，可以终止 mRNA 的转录。标记基因：功能是识别受体细胞是否含有目的基因，从而筛选出带有目的基因的细胞。BamHI 切割反应 T4DNA 连接酶 15ºC 相同的限制酶切位点连接不同的限制酶切位点 EcoRI 切割 BglⅡ 切割位点 三、 将目的基因导入受体细胞进行转化-将目的基因导入植物的方法细胞

由于动物细胞的引入，目的基因被引入微生物细胞中。农杆菌转化法、粒子枪法、花粉管传代法-显微注射法-感受态细胞靶基因进入_________，并维持在受体细胞_____和_____受体细胞稳定表达1、的方法目的基因导入植物细胞：农杆菌转化（1）农杆菌：（2）适用原理及范围：三、将目的基因导入受体细胞2、将目的基因导入动物细胞（1）方法：显微注射（2）程序：载体纯化-取卵-显微注射）-早期胚胎培养-胚胎移植-发育三、 -DNA分子杂交（DNA-DNA）法-分子杂交（DNA-RNA）法-抗原-抗体杂交（蛋白质杂交） DNA分子杂交示意图是利用一定的技术手段，将两个DNA分子的单链生物体在一起。如果两条单链有互补的碱基序列，那么互补的碱基序列就会结合在一起形成杂交双链区；在没有互补碱基序列的地方，仍然有两条游离的单链。

1） 以下说法正确。A. 所有限制酶只能识别特定的核苷酸序列。B. 质粒是基因工程中唯一的载体。C、载体必须具备的条件之一是：具有多个限制性内切酶切点，可以连接外源基因。D和基因控制的性状可以在后代中表现出来。C. 巩固练习 2） 不是质粒。选择它作为基因载体的原因是A.可以复制B.有多个限制酶切位点C，有一个标记基因D，是环状DNA D3）在基因工程的描述中，错误是() A, DNA ligase 将是粘性末端的碱基 用于连接 B, 使用限制性内切酶获得目的基因 C, 目的基因必须通过载体导入受体细胞 D、人工合成目的基因不需要限制性内切酶获得目标基因。B.重组质粒的形成在细胞内完成。C. 质粒可用作载体。D. 蛋白质的结构可以为目的基因的合成提供信息。D5）基因工程是从DNA分子层面设计构建安全日志。施工现场提供用电安全规范、施工周报、临时用电施工组织设计及施工总布置图。在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的步骤为 A、靶基因的人工合成 B、靶基因与载体的结合 C、将靶基因导入受体细胞 D、靶基因的检测和表达基因C6)以下对基因工程应用的描述是正确的。A. 基因治疗是将缺陷基因诱导为正常基因。B.基因诊断的基本原理是DNA分子杂交。C. 基因探针可以检测水 D. 原核基因不能用于真核生物的遗传改良。B（2006江苏卷15题） 中国科学家利用基因工程技术将苏云金芽孢杆菌抗虫基因导入棉花细胞并成功表达培养。由防虫棉制成。以下说法不正确

A. 基因非编码区对于在棉花细胞中表达抗虫基因是必不可少的。将碱基对添加到重组 DNA 分子上不一定会导致毒性蛋白的毒性丧失。抗虫棉的抗虫基因可以通过花粉传给相关作物，造成基因污染。转基因棉花是否具有抗虫性是通过测试棉花对抗生素的抗性来确定的。D（2006年国家卷一，5题）利用基因工程技术将人凝血因子基因导入山羊受精卵，培育出转基因绵羊。然而，人类凝血因子只存在于转基因羊的乳汁中。以下描述正确，为A。人细胞中凝血因子基因编码区的碱基对数等于凝血因子氨基酸数目的三倍。显微注射技术可用于将含有人凝血因子基因的重组DNA分子导入绵羊受精卵C。在这个转基因样品中，人凝血因子基因存在于乳腺细胞中，但不存在于其他体细胞中。人类凝血因子基因转录后，DNA连接酶以一串DNA分子为模板合成mRNAB（2006四川第4卷）基因工程技术使大肠杆菌能够合成人类蛋白质。下列说法不正确的是A。通常使用相同的限制性内切酶处理目的基因和质粒B。DNA连接酶和RNA聚合酶是构建重组质粒酶的必备工具 C.含抗生素培养基可用于检测大肠杆菌 是否已引入重组质粒 D.引入大肠杆菌的目的基因可能未能顺利快递B（2006江苏卷41）。基因工程又称基因剪接技术。

目的基因片段自连接，载体与目的基因片段连接环状DNA分子1.3 基因工程应用——基因工程的应用是基因工程基本操作程序的必然结果）一、植物基因工程植物基因工程技术主要用于提高作物的抗逆性、提高作物品质和利用植物生产药物等方面。1、 抗虫转基因植物的方法：从某些生​​物体中分离出具有杀虫活性的基因，引入作物中，使其抗虫。靶基因：Bt毒蛋白基因蛋白酶抑制剂基因淀粉酶抑制剂基因、植物凝集素基因等2、 抗病转基因植物是通过转基因技术培育出具有抗病性（对病毒、细菌、真菌等病原体的抗性）的转基因植物。常用基因：病毒外壳蛋白基因（CP基因）病毒复制酶基因几丁质酶基因抗毒素合成基因基因：调节细胞渗透压基因、抗冻蛋白基因、抗除草剂基因4、经常使用转基因提高植物品质

使用的基因：一些必需氨基酸含量高的蛋白质编码基因：将它们引入植物中，或改变这些氨基酸合成途径中某些酶的活性。提高动物的生长速度，如：将生长激素基因转入各种种畜2、以提高畜产品质量，如：将肠道乳糖酶基因转入奶牛3、使用基因工程技术用转基因动物生产药物实现动物乳腺生物反应器操作流程：获得目的基因（如血清蛋白基因），构建基因表达载体（在血清白蛋白基因前加入特异性表达启动子），显微注射到哺乳动物受精卵中, 形成胚胎, 并将胚胎送入其中 母体动物发育成转基因动物（只有转移的基因才能在个体雌性动物中表达）4、 使用转基因动物作为器官移植的供体动物：存在的问题：解决方案：猪免疫排斥是将供体基因组引入某种基因调控因子抑制表位基因的表达，或尝试去除表位基因，结合克隆技术，培育出无免疫排斥的转基因克隆猪器官。三、基因工程药物工程菌：利用基因工程方法获得外源基因在细菌细胞系中的高效表达。我国生产的产品：Interleukin-2（糖蛋白）、干扰素（糖蛋白）、乙肝疫苗（乙肝病毒表面抗原）等基因的表达产物发挥作用，达到治疗疾病的目的。意义：治疗遗传病*有效的手段。

体外基因治疗： 体内基因治疗：从患者培养中获得某种细胞-体外完成基因转移-选择成功转移的细胞扩增培养-重新注射到患者体内。将基因直接转移到人体组织细胞。基因治疗中使用的基因类型 A. 从健康人身上分离出来的具有正常功能的基因，以替代患病基因或依赖其表达产物。B. 反义基因。即产生的mRNA分子与患病基因产生的mRNA互补，阻断蛋白质合成。C. 编码可以杀死癌细胞的蛋白酶基因——自杀基因。1.4 蛋白质工程基因工程与蛋白质工程的比较：基因工程：原则上只能生产自然界中已经存在的蛋白质。蛋白质工程：它可以创造自然界中没有的新蛋白质。它是基因工程的延伸。蛋白质工程的概念：根据蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系，通过基因改造或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造出新的蛋白质，以满足人类生产和生活的需求。二、蛋白质工程基因mRNA转录基本原理氨基酸序列（多肽链）翻译蛋白质三维结构折叠原理：逆中枢法则蛋白质工程仓库管理流程财务报销流程辞职流程报销流程新员工入职流程中心原则 三、 蛋白质工程的进展与展望 蛋白质工程汇集了当代分子生物学等学科的一些前沿领域的*新成果。它结合了核酸与蛋白质的结合、蛋白质的空间结构和生物学功能。蛋白质工程将蛋白质和酶的研究推向了一个新的时代，为蛋白质和酶在工业、农业和医学中的应用开辟了诱人的前景。蛋白质工程开辟了一个根据人类意愿转化和创造满足人类需求的蛋白质的新时代。但由于对大多数蛋白质的高层结构认识不足，目前成功的例子并不多。